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目的系统评价急性脑梗死rt-PA静脉溶栓后出血性转化的相关危险因素。方法计算机检索PubMed、Web of Science、The Cochrane Library、EMbase、CBM、CNKI、WanFang Data、VIP数据库,搜集与急性脑梗死rt-PA静脉溶栓后出血性转化危险因素相关的队列研究或病例-对照研究,检索时限从2010年1月~2020年1月,由2名研究者独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险,采用Rev Man 5.1软件进行meta分析。结果共纳入32个研究,包括1352例患者。meta分析结果显示:大面积脑梗死[OR=4.50,95%CI:1.77~11.47],脑白质疏松[OR=2.91,95%CI:1.68~5.02],溶栓前血糖[OR=3.44,95%CI:2.46~4.81],溶栓后收缩压[OR=2.39,95%CI:1.44~3.96],发病至溶栓时间[OR=2.47,95%CI:1.24~4.91],NIHSS评分[OR=1.11,95%CI:1.08~1.14],房颤[OR=2.80,95%CI:2.13~3.67],是急性脑梗死rt-PA静脉溶栓后出血性转化的危险因素。血尿酸[OR=0.99,95%CI:0.98~1.00]是急性脑梗死rt-PA静脉溶栓后出血性转化的保护因素。结论此次meta分析表明了8项研究因素与急性脑梗死rt-PA静脉溶栓后出血性转化相关,考虑到偏倚存在的可能性,应谨慎解释上述结果,不应让其成为阻止溶栓的理由。

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META分析 出血性转化 急性脑梗死 静脉溶栓 危险因素 重组组织纤溶酶原激活剂(rt-PA)

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目的:探讨血清晚期糖基化终末产物(AGEs)及可溶性期糖基化终末产物受体(sRAGE)与急性脑梗死后出血性转化(hemorrhagic transformation,HT)的相关性。方法:将2017年1月至2019年12月于我院诊治的131例急性脑梗死患者纳入研究对象,根据患者是否出现出血性转化将其分为HT组及NHT组,比较两组患者AGEs、sRAGE等实验室指标,采用多因素Logistic回归模型对影响急性脑梗死出血性转化的因素进行分析,并采用Pearson相关模型对血清中AGEs水平与sRAGE水平的相关性进行分析。结果:HT组患者合并糖尿病史、心房颤动病史比例、脑栓塞比例、梗死面积、采用...

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出血性转化 急性脑梗死 可溶性期糖基化终末产物受体 晚期糖基化终末产物

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目的:探讨血清晚期糖基化终末产物(AGEs)及可溶性期糖基化终末产物受体(sRAGE)与急性脑梗死后出血性转化(hemor-rhagic transformation,HT)的相关性.方法:将2017年1月至2019年12月于我院诊治的131例急性脑梗死患者纳入研究对象,根据患者是否出现出血性转化将其分为HT组及NHT组,比较两组患者AGEs、sRAGE等实验室指标,采用多因素Logistic回归模型对影响急性脑梗死出血性转化的因素进行分析,并采用Pearson相关模型对血清中AGEs水平与sRAGE水平的相关性进行分析.结果:HT组患者合并糖尿病史、心房颤动病史比例、脑栓塞比例、梗死面积、采用抗凝治疗比例及血清中IL-1β、TNF-α、AGEs水平明显高于NHT组(均P＜0.05);多因素Logistic回归分析示大梗死面积、高IL-1β、TNF-α及AGEs水平是患者出现急性脑梗死后出血性转换的保护因素(OR=0.625,0.832,0.874,0.708;均P＜0.05),而无抗凝治疗、高sRAGE则是患者出现急性脑梗死后出血性转换的危险因素(OR=10.901,1.004;均P＜0.05);相关性分析示血清中sRAGE水平与AGEs、IL-1β及TNF-α水平呈明显负相关(ρ=-0.852,-0.828,-0.826;均P＜0.05).结论:血清AGEs是急性脑梗死患者出现出血性转化的危险因素,而sRAGE则是保护因素,sRAGE可能通过抑制RAGE与AGEs结合,从而减少释放炎症介质,减轻血管损伤,降低HT发生风险.

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目的 系统评价急性脑梗死rt-PA静脉溶栓后出血性转化的相关危险因素.方法 计算机检索PubMed、Web of Science、The Cochrane Library、EMbase、CBM、CNKI、WanFang Data、VIP 数据库,搜集与急性脑梗死rt-PA静脉溶栓后出血性转化危险因素相关的队列研究或病例-对照研究,检索时限从2010年1月～2020年1月,由2名研究者独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险,采用Rev Man 5.1软件进行meta分析.结果 共纳入32个研究,包括1352例患者.meta分析结果显示:大面积脑梗死[OR=4.50,95％CI:1.77～11.47],脑白质疏松[OR=2.91,95％CI:1.68～5.02],溶栓前血糖[OR=3.44,95％CI:2.46～4.81],溶栓后收缩压[OR= 2.39,95％CI:1.44～3.96],发病至溶栓时间[OR= 2.47,95％CI:1.24～4.91],NIHSS 评分[OR=1.11,95％CI:1.08～1.14],房颤[OR=2.80,95％CI:2.13～3.67],是急性脑梗死rt-PA静脉溶栓后出血性转化的危险因素.血尿酸[OR= 0.99,95％CI:0.98～1.00]是急性脑梗死rt-PA静脉溶栓后出血性转化的保护因素.结论 此次meta分析表明了8项研究因素与急性脑梗死rt-PA静脉溶栓后出血性转化相关,考虑到偏倚存在的可能性,应谨慎解释上述结果,不应让其成为阻止溶栓的理由.

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meta分析 出血性转化 急性脑梗死 静脉溶栓 危险因素 重组组织纤溶酶原激活剂(rt-PA)

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目的系统评价急性脑梗死rt-PA静脉溶栓后出血性转化的相关危险因素。方法计算机检索PubMed、Web of Science、The Cochrane Library、EMbase、CBM、CNKI、WanFang Data、VIP数据库,搜集与急性脑梗死rt-PA静脉溶栓后出血性转化危险因素相关的队列研究或病例-对照研究,检索时限从2010年1月～2020年1月,由2名研究者独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险,采用Rev Man 5.1软件进行meta分析。结果共纳入32个研究,包括1352例患者。meta分析结果显示:大面积脑梗死[OR=4.50,95%CI:1.77～11.4...

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meta分析 出血性转化 急性脑梗死 静脉溶栓 危险因素 重组组织纤溶酶原激活剂(rt-PA)

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脑白质高信号是一种常见的脑小血管病影像学表型。许多缺血性卒中患者会合并脑白质高信号。严重脑白质高信号可增高急性缺血性卒中患者静脉溶栓治疗后出血性转化风险，对患者转归造成不利影响，需引起临床医生的注意。

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白质 卒中 脑白质疏松 脑缺血 血管内手术 血栓切除术 血栓溶解疗法 治疗结果

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摘 要 研究背景： 急性脑梗死患者用重组组织型纤溶酶原激活剂（recombinant tissue plasminogen activator, rt-PA）溶栓后最常见，最危险的并发症是出血性转化（hemorrhagic transformation，HT），能影响预后，严重者可直接致死，且目前尚缺乏有效的预防措施。此外，出血性转化也是限制溶栓时间窗的主要危险因素。如何减少HT的发生率和严重程度是增加rt-PA溶栓安全性的关键。急性脑梗死后，尤其是rt-PA溶栓后，基质金属蛋白酶9（MMP-9）过度表达，过量的MMP-9降解细胞外基质，导致血脑屏障完整性的破坏是发生HT的基础之一。因此，如何降低rt-PA溶栓后MMP-9的过量表达是减少HT发生率和严重程度的关键。受体相关蛋白（receptor associated protein, RAP）是低密度脂蛋白受体相关蛋白1（LRP-1）的特异性抑制剂，能特异性拮抗LRP-1的生物活性。而LRP-1不仅是MMP-9和TIMP-1的配体，也是t-PA的配体，因此，理论上拮抗LRP-1的活性能阻断t-PA对MMP-9表达的促进作用，但至今未见相关报道。本研究旨在阐述，RAP联合rt-PA溶栓对增加rt-PA溶栓安全性的作用，为急性脑梗死的治疗提供新的思路。 研究方法： 采用自体血栓法制作SD大鼠大脑中动脉闭塞模型。大鼠分成假手术组，生理盐水（NS）组，rt-PA+RAP联合溶栓组和rt-PA单独溶栓组。除假手术组外，其余大鼠均行自体血栓栓塞术，术中注入10枚长约2mm，直径约0.3mm的血栓，而假手术组则行相同的手术过程但不注入栓子，只注入等体积的PBS。模型完成后取脑行HE染色，观察急性脑梗死后不同部位的病理变化，并评价模型成功率，同时行LRP-1免疫组化染色，观察急性脑梗死后LRP-1的表达。用TTC染色观察脑梗死面积，用FITC-dextran灌注法观察血管再通情况，用激光多普勒血流仪观察不同时段的血流情况，用组织氧分压仪观察局部组织的血氧恢复情况，用动静脉血气分析法分析组织的代谢活性，以上指标用于研究rt-PA联合RAP溶栓对溶栓效率的影响。用大鼠脑组织血红蛋白定量法定量HT的严重程度，用伊文思蓝渗漏法定量血脑屏障的破坏程度，用mNSS评分评价大鼠的神经功能缺损程度，以上指标用于检测rt-PA联合RAP溶栓对增加溶栓安全性的作用。大鼠取脑后匀浆，提取蛋白和mRNA后，用Western blot法，real-time PCR法，明胶酶谱和反向明胶酶谱法分别定量MMP-9和TIMP-1的蛋白表达量、mRNA表达量和活性。此外，我们还研究了，大鼠的生存期，活动能力和体重变化曲线，用于探索RAP联合rt-PA溶栓对大鼠长期预后的影响。数据用SPSS 19.0统计软件分析，结果用 ±s表示，同一组数据间采用单因素方差分析，不同时间点结果与基础组对照用Dunnett-t检验，两两比较采用LSD检验。 结果： SD大鼠行自体血栓栓塞模型后出现了明显的病理生理改变，且在血管内可见梗塞的血栓，提示该模型稳定可靠，且能用于溶栓研究。LRP-1正常脑组织中呈低表达，但在梗死区内的表达量明显增加。用RAP联合rt-PA溶栓相比rt-PA单独溶栓能明显减少梗死面积，并在能更早期快速使血流复通，但不影响梗死半球血流的远期恢复程度。以上结果提示RAP能增加rt-PA的溶栓效率。RAP联合rt-PA溶栓能明显减少出血性转化的严重程度，减少伊文思蓝的渗漏，并改善脑梗死大鼠的神经功能缺损程度，提示RAP能增加rt-PA溶栓的安全性。进一步研究提示，rt-PA溶栓后MMP-9的表达量明显增加，但TIMP-1的表达量增加不显著，导致MMP-9/TIMP-1的比值失衡，同时rt-PA也能增加MMP-9的活性。RAP与rt-PA联合溶栓后能显著减少MMP-9的表达量，并增加TIMP-1的表达，同时也能减少MMP-9的活性，并增加TIMP-1的活性。RAP联合rt-PA溶栓还能较rt-PA单独溶栓，显著增加大鼠的长期生存时间，加快大鼠的体重恢复速度并改善大鼠的运动能力。 结论： 1）急性脑梗死后，梗死区脑组织内LRP-1的表达量显著增加；2）RAP联合rt-PA溶栓能增加rt-PA的溶栓效率；3）RAP联合rt-PA溶栓能减少由rt-PA导致的出血性转化的严重程度，增加溶栓安全性；4）RAP能中和由rt-PA导致的MMP-9/TIMP-1比值失衡，并减少MMP-9的活性；5）RAP联合rt-PA溶栓能增加大鼠的长期预后。

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出血性转化 低密度脂蛋白受体相关蛋白1 脑梗死 受体相关蛋白

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急性脑梗死严重威胁着人们的健康，且随着我国人口结构的转变，脑梗死的发病率和死亡率都将进一步提高。影响脑梗死发生和发展的因素很多，其中纤溶系统起了关键作用，维持纤溶系统功能的相对平衡状态对脑梗死的治疗具有重要意义。纤溶活性主要受t-PA（tissue plasminogen activator）和PAI-1（plasminogen activator inhibitor）的调节，t-PA和PAI-1表达比例失调是影响纤溶活性的关键。已知Shh能促进t-PA的表达，并抑制PAI-1的表达，其结果可激活内源性纤溶系统，加速血栓溶解。因此，此作用在脑梗死治疗中有重要意义，但未见进一步的研究。目前对Shh调节t-PA和PAI-1表达的机制还不清楚，且调节机制独立于Shh经典信号通路。我们结合以前的研究和我们的前期研究结果，提出LRP-1（low density lipoprotein receptor-related protein）是重要的中继蛋白，且存在由Shh/LRP-1/t-PA、PAI-1组成的新的信号通路的假说。有2个已知观点支持此假说：其一为，Shh能促进t-PA并抑制PAI-1的表达；其二为，t-PA和PAI-1都是LRP-1的配体。尚有两点未知：其一为，LRP-1在脑梗死组织中的表达和作用；其二为，Shh和LRP-1间的关系。 为解决其中未知，我们设计了实验一和实验二。在实验一中，我们用自体血栓栓塞法模拟脑梗死，用LRP-1的特异性抑制剂——受体相关蛋白（receptor-associated protein, RAP）——抑制LRP-1的活性。结果显示，RAP能从mRNA转录水平调节t-PA和PAI-1的表达并能明显改善脑梗死预后，减少脑梗死面积，并抑制出血性转化。此结果显示了LRP-1通路在脑梗死治疗中的价值，可作为脑梗死治疗的新的潜在靶点。在实验二中，我们在体外糖氧剥夺培养（oxygen-glucose deprivation, OGD）的人脑微血管内皮细胞（human brain microvascular endothelial cells, HBMEC）中观察Shh和LRP-1的关系。用不同浓度的外源性r-Shh和Shh的特异性抗体anti-Shh抑制Shh的活性，结果提示Shh能增加OGD培养细胞的LRP-1的表达。我们接着用Shh通路中间蛋白Smo的特异性拮抗剂和激活剂与Shh一起作用于细胞，结果显示两种因子均不能改变Shh抑制LRP-1表达的结果。总结本实验，Shh能调节OGD培养的HBMEC细胞表达LRP-1，且此作用不通过其经典通路。 在实验一和二的基础上，我们设计了实验三和实验四，进一步研究了Shh在脑梗死中的潜在治疗作用和调节t-PA和PAI-1的机制。在实验三中，我们用不同浓度的r-Shh对MCAO的大鼠行脑室注射，结果显示，Shh能增加梗死区内t-PA的表达并抑制PAI-1的表达，进一步比较t-PA/PAI-1的比值发现Shh能增加二者比值，提示Shh能促进脑梗死后的纤溶活性。同时我们还发现Shh能显著改善脑梗死后脑代谢，减少梗死面积并改善预后。此实验提示Shh能促进脑梗死后纤溶活性，促进血栓溶解改善脑氧代谢，并改善预后。为研究Shh调节t-PA和PAI-1的机制，我们设计了实验四。在实验四中，我们在HBMEC细胞中研究其机制，结果发现LRP-1介导了Shh对t-PA和PAI-1的表达，且此作用独立于Shh的经典通路。 由此，本课题利用分子及细胞生物学和免疫学等技术，综合研究Shh调节脑梗死后t-PA和PAI-1表达的作用及意义，并探索Shh通过LRP-1调节t-PA和PAI-1表达的机制。阐述了Shh在脑梗死中的潜在治疗作用，对其中机制的研究，我们探索并初步证明了可能存在的新信号通路，为脑梗死的研究提供了新的思路和治疗靶点。

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脑梗死 纤溶活性 纤溶酶原激活剂抑制因子1 音猬因子 组织型纤溶酶原激活剂

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Abstract ：

研究背景：急性脑梗死后由于栓子脱落，梗死区侧枝循环开放等原因，使缺血区血管复灌注，而血管由于缺氧导致通透性增加再加上再灌注损伤，导致梗死区内继发性出血，即所谓脑梗死后出血性转化（hemorrhage transformation，HT）。HT的发生可严重影响脑梗死患者的预后，增加致残率和死亡率。HT的发生机制一直是研究的热点，目前研究主要集中于急性脑缺血后的BBB完整性破坏，其中尤以Ⅳ型胶原的降解最为重要。脑缺血后在缺血区大量增加的基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase-9，MMP-9）被认为是Ⅳ型胶原降解的主要原因。在正常脑组织中不表达MMP-9，脑缺血区中MMP-9的来源一直是争论的话题。从大量的研究中我们发现，以中性粒细胞和单核细胞为主的白细胞在脑缺血后大量浸润并沉积于微血管周围，在发生严重出血性转化的脑组织中更加明显，且在白细胞沉积区，基底膜的完整性破坏更加严重；而且无论是中性粒细胞还是单核细胞都可以高表达MMP-9。因此我们相信白细胞分泌的MMP-9与急性脑梗死后出血性转化有密切联系。基质金属蛋白酶组织抑制因子（tissue inhibitor of metalloproteinase-1，TIMP-1）是MMP-9的天然抑制剂，两者表达量的平衡对维持基底膜的完整性具有重要作用，MMP-9/TIMP-1比例的失衡是引起很多疾病的关键因素。有关脑缺血后白细胞分泌MMP-9和TIMP-1的特点的研究较少，而由于临床研究的限制，有关在脑梗死早期（＜6h）白细胞分泌MMP-9及TIMP-1特点的研究更少。本研究在大鼠中建立大脑中动脉梗塞模型以及在体外研究中性粒细胞和单核细胞，在脑梗死早期分泌MMP-9及TIMP-1的特点，以此来说明白细胞在脑梗死后出血性转化中的作用。研究方法：采用自体血栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞模型。取30min，1h，1.5h，2h，3h，6h共6个不同时间点，实验组行自体血栓栓塞术，对照组行相同手术但不注入栓子只注入等量PBS。每组动物随机选择一只在术前取血，作为基础对照。取血分离血浆用ELISA法检测MMP-9和TIMP-1，并提取全血细胞mRNA，RT-PCR法检测白细胞总MMP-9和TIMP-1的mRNA的表达。脑组织行HE染色和免疫组化染色。在离体实验中分离中性粒细胞和单核细胞分别培养，用脂蛋白刺激细胞分别观察中性粒细胞和单核细胞分泌MMP-9及TIMP-1的特点。ELISA法检测各时间点培养上清液中MMP-9和TIMP-1含量，提取细胞蛋白用western blot法检测MMP-9的表达，再提取RNA用RT-PCR法检测细胞总MMP-9和TIMP-1的mRNA的表达。数据用SPSS13.0统计软件分析，结果用 ±s表示，同一组数据间采用单因素方差分析，不同时间点结果与基础组对照用Dunnett-t检验，两两比较采用LSD检验。结果：在动物实验中，血浆ELISA结果示急性脑梗死后血浆中MMP-9浓度反应迅速，在术后半小时即可测得有明显升高（P＜0.05），在观察时间内（6h内）都可见升高，而TIMP-1反应较慢，在术后2小时才有明显升高（P＜0.05）。MMP-9 mRNA在急性脑梗死后2h才可测得明显升高（P＜0.05），而TIMP-1 mRNA在脑梗死后1.5h可测得明显升高（P＜0.05），与血浆中ELISA浓度变化趋势类似。在细胞实验中，中性粒细胞暴露于LPS后，在10min即可在培养上清液测得MMP-9分泌增加（P＜0.05），而mRNA则在30min才增加（P＜0.05），两者都在3h时达到最高峰，至6h时未再升高。中性粒细胞培养上清中TIMP-1只有微量表达。单核细胞表达MMP-9和TIMP-1相对较慢，在3h才可测得有升高（P＜0.05），但单核细胞对LPS的反应时间较长，直至6h仍有明显升高。细胞裂解液western blot结果提示中性粒细胞中预存有大量MMP-9，在LPS刺激的早期（＜30min）中性粒细胞主要分泌预存的MMP-9，直至1h后才可测得表达量升高（P＜0.05）。单核细胞内MMP-9的表达量的变化和其mRNA的变化一致，在LPS刺激3h后才可测得升高（P＜0.05）。结论：1）在脑缺血后30min血浆中MMP-9含量即可升高，其最初的来源是中性粒细胞中预存的MMP-9；2）中性粒细胞表达MMP-9 mRNA有明显滞后性，且不表达TIMP-1；3）单核细胞对外界刺激反应较中性粒细胞迟钝，表达MMP-9和TIMP-1较慢；4）梗死区脑组织细胞MMP-9免疫染色改变要早于细胞病理改变；5）脑组织中的MMP-9最初来源于外周血；6）最初浸润至脑组织的白细胞是单核细胞，且MMP-9免疫染色为阴性或弱阳性。

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脑卒中出血性转化基质金素蛋白酶-9基质金属蛋白酶组织抑制因子-1白细胞

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Abstract ：

临床上常常遇到低血压、休克、心跳骤停等病人，经过积极的抢治后，尽管呼吸心跳恢复，但常常遗留不同程度的脑机能障碍，乃脑缺血/再灌注损伤所致。脑缺血/再灌注损伤是临床上常见的病理生理损伤，目前认为，脑缺血再灌注损伤是多种因素和机制共同或先后作用的结果。实际上，缺血再灌注后损伤涉及极其复杂的病理生理过程，不同机制的发生时间及相互关系远未阐明，是值得进一步深入研究的课题。血脑屏障是存在于体循环和脑实质之间，调控着脑实质物质进出的结构，血脑屏障的完整性在脑缺血再灌注损伤的病理生理过程中起着重要的作用，缺血后再灌注将导致血脑屏障严重破坏。血脑屏障由内皮细胞的紧密连接，基底膜，血管周围的星形胶质细胞组成。胶原蛋白Ⅳ是基底膜的主要成分之一，对保持内皮屏障的通透性具有重要作用。脑创伤后MMP-9升高，可通过降解基底膜的Ⅳ型胶原等细胞外基质成分，而使血脑屏障的完整性破坏，通透性增加，脑水肿形成，梗塞加重，甚至发生出血性转化。 本实验构建大鼠全脑缺血再灌注损伤模型，拟研究茶多酚通过对大脑缺血/再灌注损伤后血脑屏障的保护作用，进一步揭示脑缺血/再灌注损伤的机制，并为临床治疗脑缺血/再灌注损伤提供理论依据和新的治疗方案。目的：1. 本实验拟研究在大鼠全脑缺血再灌注后，随时间变化，茶多酚是否通过影响mmp-9的表达，减轻胶原蛋白Ⅳ的分解。2. 本实验拟研究在大鼠全脑缺血再灌注后，茶多酚是否通过影响mmp-9和胶原蛋白Ⅳ的表达，从而保护血脑屏障，减轻脑水肿。3. 本实验拟研究在大鼠全脑缺血再灌注后，茶多酚是否可以通过减轻脑水肿，改善大鼠学习记忆和空间定位功能，从而改善脑缺血的预后。方法：1. 健康清洁雄性SD大鼠105只，同等条件下饲养，将实验动物随机分为4组。分别为：缺血再灌注组（IR，n=30），假手术组（PO，n=30），小剂量茶多酚干预/缺血再灌注组组（TP1，n=15，100 mg /kg, i.p），大剂量茶多酚干预/缺血再灌注组组（TP2，n=30，200mg /kg, i.p）.采用四血管阻塞法建立大鼠全脑缺血/再灌注模型。缺血时间为5min。2. 测mmp-9,胶原蛋白Ⅳ水平,观察HE切片：再灌注后6h，12h，24h 3个时间点，给予4%多聚甲醛灌注处死大鼠。分测IR组（n＝5），po组（n＝5），TP1组(n=5),TP2组(n=5)脑组织mmp－9和胶原蛋白Ⅳ水平,观察HE切片.3. 测脑水肿：脑水肿通过脑含水量来测量。缺血后24h，取IR组（n＝5），po组（n＝5），TP2组(n=5)脑组织，迅速称重，得到WW，然后脑组织在烘箱中（70°C）烘烤 72 h，再次称重得到DW。通过公式(WW－DW)/WW×100%来计算水肿程度。4. 测血脑屏障的通透性：血脑屏障的通透性用Evans Blue染料量来衡量，再灌注后23h，Evans Blue染料(4%, 4 ml/kg)被缓慢注入到IR组（n＝5），po组（n＝5），TP2组(n=5)静脉当中，之后盐水被灌入静脉当中冲洗血管中剩余的染料。断头后鼠的脑组织被取出。Evans Blue染料在脑组织中的含量用μg/ml表示。5. 神经行为学Morris 水迷宫实验：缺血后24h开始，取IR组（n＝5），po组（n＝5），TP2(n=5)，先行定位航行实验　测试大鼠空间学习和记忆能力。各组大鼠于手术后第1 天在迷宫中自由游泳3min 熟悉环境。实验历时6d ,每日连续训练4 次,大鼠随机从四个不同象限入水,记录从入水到爬上平台的时间,即逃避潜伏期( escape latency ,EL) 。爬上平台后停留20s ,然后进行下一次测试。若120 s 未找到平台,则由实验者将大鼠引导到平台上休息20s ,逃避潜伏期记为120 s。取四个象限的平均值为当日的学习成绩。同时记录当日大鼠的游泳速度。再行空间探索实验考察大鼠对原平台的记忆能力。第6天撤除平台,将动物从西南象限放入水中,记录120 s 内大鼠到达原平台所在区域的次数。结果：1. HE染色：PO组高倍镜下大鼠皮质锥体细胞排列整齐，形态完整，细胞结构清晰，胞核蓝染，核膜完整，核仁明显；IR组于再灌注6h可见皮质部分细胞出现形态变化，胞体皱缩或肿胀，再灌注24h大量细胞出现形态变化，细胞间质水肿明显，细胞周围间隙增宽，神经元数目减少，排列紊乱，分布不均，核膜界限不清，结构模糊。 TP1组于各时间点细胞形态变化较IR明显减轻。TP2组于各个时间点细胞形态变化较TP1明显减轻。2. 免疫组化染色Mmp-9：MMP-9在皮质小胶质细胞、缺血神经元、内皮细胞、嗜中性细胞中表达。阳性细胞为棕黄色淡染。PO组仅见极少量表达。再灌注后6h 、12h、24h在IR组、TP1组、TP2组均可见mmp-9的表达，并随时间增加表达增强。TP2组各时间点表达均弱于TP1组；TP1组各时间点的表达均弱于IR组。胶原蛋白Ⅳ：在皮质胶质细胞、神经元细胞、内皮细胞中均有表达。阳性细胞为棕黄色淡染。PO组表达清晰，强于IR组、TP1组、TP2组。再灌注后6h 、12h、24h在IR组、TP1组、TP2组均可见胶原蛋白Ⅳ的表达，并随时间增加表达依次减弱。TP2组各时间点表达均强于TP1组；TP1组各时间点的表达均强于IR组。3. 大鼠缺血再灌注后脑含水量OP组和TP2组，IR组相比脑含水量明显减少，TP2组和IR相比再灌注24h后脑含水量明显减少。4. 大鼠缺血再灌注后脑EB含量OP组和TP2组，IR组相比EB含量明显减少，TP2组和IR相比再灌注24h后EB含量明显减少。5. Morris 水迷宫OP组和TP2组，IR组相比逃避潜伏期明显缩短，TP2组和IR相比逃避潜伏期明显缩短。OP组和TP2组，IR组相比穿越次数明显增多，TP2组和IR相比穿越次数明显增多。结论：1. 本实验结果证明：在大鼠全脑缺血再灌注后，茶多酚在各个时间点，可通过减少大鼠全脑缺血/再灌注后mmp-9的表达，抑制胶原蛋白Ⅳ的分解。2. 本实验结果证明：在大鼠全脑缺血再灌注后，茶多酚可通过减少大鼠全脑缺血/再灌注后mmp-9的表达，减少胶原蛋白Ⅳ的分解，保护血脑屏障，减轻脑水肿。3. .本实验结果表明：在大鼠全脑缺血再灌注后，茶多酚具有脑保护作用，可以通过保护血脑屏障，减轻脑水肿。明显改善大鼠的学习和记忆能力，改善脑缺血的预后。

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mmp-9 Morris 水迷宫实验 茶多酚 胶原蛋白Ⅳ 脑缺血∕再灌注损伤 血脑屏障

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