研究意义：
单核细胞渗出血管，进入组织和器官后，可以进一步分化发育成巨噬细胞（Macrophages，缩写为MΦ），成为机体内吞噬能力最强的细胞。巨噬细胞与癌症和炎症的发生发展密切相关。在肿瘤组织中，还有大量的非肿瘤细胞（基质细胞和白细胞）及其周围的细胞外基质。其中巨噬细胞是侵润到肿瘤细胞中的主要白细胞，这些巨噬细胞被称为肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated　macrophage,　TAM）。TAM与肿瘤的发生、发展有着密切的关系。在类风湿性关节炎（RA）中，滑膜以及关节腔也聚集了大量的巨噬细胞，这些细胞是炎症发生发展的关键细胞。作为巨噬细胞上的特异性标记的表面分子Vsig4，在肿瘤和炎症的发生发展中均起到了重要的调节作用，使它成为肿瘤以及关节炎症中机制研究的热点分子。本课题旨在以巨噬细胞表面蛋白Vsig4作为靶标，研究在肿瘤患者以及肿瘤模型和关节炎模型中的表达水平，探究Vsig4在肿瘤和炎症的发生、发展过程中的作用。
研究目的：
巨噬细胞表面蛋白Vsig4作为对象，明确其在非小细胞肺癌小鼠模型中巨噬细胞表面的转录和翻译以及组织水平上的表达情况。确定肺癌患者肿瘤中Vsig4的表达程度与病变程度的关系，探究Vsig4在肿瘤发生、发展过程中的作用。通过Vsig4特异性纳米抗体（nanobody，Nb）的荧光标记，研究非小细胞肺癌小鼠模型中Vsig4在肿瘤中的表达情况，为非小细胞肺癌分子影像学探针的设计提供新的思路和方法。同时还分析了在关节炎小鼠模型中Vsig4的分布及表达情况，Vsig4在炎症发生发展中的作用进行初步探讨。
研究方法：
1）肿瘤小鼠模型中Vsig4的表达水平的研究
荷瘤小鼠模型上，在转录、翻译和组织水平上分析Vsig4的相对表达量以及各组之间的表达差异，分析与细胞因子CCL2、M-CSF、VEGF、MMPs、Ki67与Vsig4表达的相关关系。用VIS　Spectrum成像定量影像系统来检测纳米抗体anti-Vsig4在体内的标记情况。采用统计方法对相关数据进行分析。
2）Vsig4在肺癌患者的肿瘤组织上的表达分析
用免疫组织化学的方法检测Vsig4在组织中的表达情况。　采用统计学方法对相关数据进行分析。
3）在关节炎模型中对Vsig4表达情况的分析。
对关节炎小鼠模型进行临床评分，并且用免疫组织化学的方法检测Vsig4在小鼠关节中的表达情况。
实验结果：
1）在非小细胞肺癌荷瘤小鼠模型中，Vsig4在转录、翻译以及组织水平上的相对表达量在肺组织以及肿瘤组织中均随着肿瘤增大而增加，差异具有统计学意义并且在肿瘤组织中的相对表达量比肺组织中更高。
2）在肿瘤组织中Vsig4的相对表达量与VEGF、CCL2、Ki67、MMP9、CSF在肿瘤中的相对表达量呈正相关关系。
3）在 IVIS　Spectrum成像定量影像系统实验中，用Cy7荧光标记的Vsig4纳米抗体，在1小时后肿瘤中的阳性信号不明显，但是在3小时后，Cy7荧光标记的Nb在荷瘤动物模型上特异性在肿瘤和区域积累。处死小鼠后，发现探针主要在肿瘤组织中累积。
4）Vsig4的相对表达量在肺癌患者肿瘤组织中显著高于癌旁组织，差异具有统计学意义。
5）在关节炎小鼠模型中，在炎性关节处检测出Vsig4的阳性细胞，这些细胞同时显示F4/80阳性，表明Vsig4阳性细胞是巨噬细胞亚型，且随着病变严重程度增多。
主要结论：
1）Vsig4在3LL细胞诱导的C57小鼠荷瘤模型中在肺以及肿瘤组织中的表达量均高于正常组，并且在肿瘤组织中的Vsig4表达对CCL2、VEGF等因子呈现正相关关系。
2）在IVIS　Spectrum成像定量影像系统实验中，Cy7荧光素标记的纳米抗体anti-Vsig4在3小时后可以在肿瘤以及肺检出荧光信号，为纳米抗体anti-Vsig4对肿瘤诊断技术的提供了新的可能。
3）在肺癌患者中，在肿瘤组织中Vsig4的表达对比在癌旁组织显著增加，提示了其可能参与肺癌的病程。
4）在CIA模型中，在关节炎症处检测出Vsig4的阳性细胞，且随着病变严重程度增加阳性细胞数增多，提示巨噬细胞可能在关节炎中局部增生聚集。