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侯书兰 (侯书兰.)

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碳量子点(CQDs)作为有效标记干细胞的新型纳米材料正在兴起,除了具有优于其他荧光材料的光学特性外,还具有低毒性和良好的生物相容性。许多参数,比如尺寸、组成和表面电性都会影响CQDs的标记效率和生物相容性。因此,需要对CQDs进行更加合理的表面修饰以提高它对干细胞的标记效率。
在目前的研究中,我们用柠檬酸二铵(DC)和亚精胺(Spd)以不同的比例混合通过一步干燥加热法得到了四种不同电性的CQDs。我们将四种电性不同的碳量子点用于人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)的标记,研究电性对hUCMSCs的毒性和标记情况的影响,论文的内容主要包括以下几个方面:
(1) CQDs的合成和表征。我们用一步干燥加热法通过改变DC和Spd的质量混合比合成了四种不同电性的CQDs (C-a, C-b, C-c, 和 C-d),四种CQDs的直径都在3-5 nm,电性,从-6.78, -2.78, +4.12 到 +23.00 mV。在紫外激发光照射下可以发出蓝色的荧光,四种CQDs的荧光强度为C-a>C-b>C-c>C-d。
(2)CQDs对hUCMSCs的毒性的影响。通过CCK-8和ROS实验发现,四种不同电性的CQDs在50 µg/mL的浓度对hUCMSCs的活力和ROS的产生与对照组(没加CQDs处理的细胞)无明显差异,但在高浓度时,C-d CQDs产生了一定的毒性。在本实验中,50 µg/mL作为CQDs标记hUCMSCs的亚毒性浓度。
(3)hUCMSCs对不同电性CQDs的摄取及CQDs在hUCMSCs中的稳定性。通过检测不同孵育时间下,hUCMSCs对四种CQDs的摄取,我们确定24 h作为CQDs标记hUCMSCs的最佳时间。结果表明,虽然正电性的 CQDs有较低的光致发光,但它们能更多的被干细胞摄取,带强正电的C-d CQDs被摄入的量和稳定性是最高的。但由于带强正电的C-d CQDs抑制了hUCMSCs的长期增殖,所以弱正电的C-c CQDs具有更好的生物相容性,是示踪hUCMSCs的最佳选择。本研究将有助于CQDs的修饰和优化以示踪干细胞,为干细胞的示踪提供有益的见解 。
(4)CQDs对hUCMSCs干性潜力的影响。作为多能干细胞,hUCMSCs具有自我更新和分化的潜能,在我们的研究中,只有带有强正电的C-d CQDs减弱了hUCMSCs的分化能力。结果表明,虽然正电性的CQDs具有更高的标记效率,但不是正电越强越好,还需要进一步的研究,找到CQDs示踪干细胞的最佳表面电荷以平衡生物相容性和标记效率的问题。

Keyword:

标记效率 表面电荷 人脐带间充质干细胞 碳量子点 细胞毒性

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  • [ 1 ] 西安交通大学医学部

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Degree: 硕士

Mentor: 张东东

Student No.:

Year: 2018

Language: Other

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